天天射天天爽-天天射天天添-天天射天天舔-天天射天天做-天天射网

當前位置:
首頁 > 技術文章 > 明膠酶譜實驗是分子生物學的常用實驗技術之一
目錄導航 Directory
服務熱線
技術支持Article
明膠酶譜實驗是分子生物學的常用實驗技術之一
點擊次數:767 更新時間:2022-12-23
    細胞外基質(extracellular matrix,ECM)是由大分子構成的錯綜復雜的網絡。為細胞的生存及活動提供適宜的場所,并通過信號轉導系統影響細胞的形狀、代謝、功能、遷移、增殖和分化。
  基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)可以降解細胞外基質成份,需要Ca2+、Zn2+等金屬離子作為輔助因子,是一組具有許多共同生化性質的可降解細胞外基質的酶。基質金屬蛋白酶2(MMP2)主要降解IV型膠原,基質金屬蛋白酶9(MMP9)可以降解彈性蛋白、膠原蛋白、明膠和纖維蛋白等細胞外基質的成分。基質金屬蛋白酶的失調是多種疾病發生、發展的重要機制之一。
  明膠酶譜實驗可以檢測MMP2和MMP9的活性,是分子生物學的常用實驗技術之一。先將樣品進行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明膠)電泳分離,然后在有二價金屬離子存在的緩沖系統中使樣品中的MMP-2和MMP-9恢復活性,在各自的遷移位置水解凝膠里的明膠,最后用考馬斯亮藍將凝膠染色,再脫色,在藍色背景下可出現白色條帶,條帶的強弱與MMP-2和MMP-9活性成正比。
  酶譜法的基本過程是先將樣品進行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明膠)電泳分離,然后在有二價金屬離子存在的緩沖系統中使樣品中的MMP-2和MMP-9恢復活性,在各自的遷移位置水解凝膠里的明膠,最后用考馬斯亮藍將凝膠染色,再脫色,在藍色背景下可出現白色條帶,條帶的強弱與MMP-2和MMP-9活性成正比。
  復性原理:在電泳過程中,SDS與樣品中的MMPs結合(當然是可逆性結合),破壞其氫鍵、疏水鍵而使MMPs不能發揮其分解明膠的作用,而只有當將膠置Trition中洗脫(最好是放在搖床上搖,30min/次,做2次或15min/次,4次。靜置于Trition中是不妥的。)時,由于SDS被Trition結合而去除,從而使MMPs恢復了活性。

滬公網安備 31011802001676號

主站蜘蛛池模板: 国产一级特黄在线播放 | 爱爱小视频在线看免费 | 国产综合成人亚洲区 | 三级网址在线 | 鸥美黄色片 | 国精视频一区二区视频 | 国产国产成人人免费影院 | 国产日韩欧美一区二区三区视频 | 日本在线亚州精品视频在线 | 美日韩一级 | 黄色一级视频网站 | 亚洲高清在线视频 | 免费黄在线看 | 国产一区二区免费播放 | 国产精品亚洲欧美大片在线看 | 第一页综合 | 在线观看免费情网站大全 | 亚洲精品三区 | 小明看片成人永久在线观看 | 麻豆91免费视频 | 香蕉在线视频网站 | 国产日本三级欧美三级妇三级四 | 免费爱爱的视频太爽了 | 国产精品自在自线免费观看 | 国产69精品久久久久9牛牛 | 欧美日韩中文字幕久久伊人 | 国产网红精品 | 亚洲色图吧 | 日韩亚洲一区中文字幕 | 中国欧美日韩一区二区三区 | aaa在线观看高清免费 | 国产一区二区三区丶四区 | 国产va免费精品观看精品 | 国产a免费视频 | 日韩精品一区二区三区中文字幕 | 国产麻豆高清在线观看 | 亚洲最大在线视频 | 日本一区二区免费在线观看 | 亚洲国产精品网站久久 | 国内视频精品 | 高清国产美女一级a毛片录 高清国产美女在线观看 |