天天射天天爽-天天射天天添-天天射天天舔-天天射天天做-天天射网

當前位置:
首頁 > 技術文章 > 免疫沉淀CHIP實驗中要注意的事項有哪些?
目錄導航 Directory
服務熱線
技術支持Article
免疫沉淀CHIP實驗中要注意的事項有哪些?
點擊次數:986 更新時間:2022-09-14
  染色質免疫沉淀技術(ChIP)通過與染色質片段共沉淀技術,在體內檢測與特異蛋白質結合的DNA片段。ChIP技術最大的優點就是在活體細胞狀態下研究了蛋白質和目的基因結合狀況,減少了體外實驗的誤差。在活體細胞中,先對與調節蛋白結合的染色質進行分離,然后隨機剪切染色質,用調節蛋白的抗體沉淀目的染色質,最后用QPCR、DNA測序的方法進行檢測研究。
  因為免疫沉淀的目的主要是通過抗體和目的蛋白相互作用從而捕獲目的蛋白,所以實驗中要注意的關鍵點是抗體和目的蛋白相互作用的效果。其主要受抗體的結合能力,目的蛋白和抗體的可接觸性兩個因素影響。所以免疫沉淀實驗中的關鍵因素是抗體的選擇以及裂解緩沖液中的配方。對于前者而言,抗體所針對的作用表位必須處于目的蛋白表面,對抗體結合力的要求和免疫印跡或者免疫熒光相比要高得多;對于后者而言,主要考慮因素是緩沖液中的去垢劑成分能否在不破壞目的蛋白天然構像的情況下(不影響目的蛋白和抗體的相互作用效果)將目的蛋白從細胞局部定位(比如位于某些細胞器中)中有效釋放出來。
  在所有免疫沉淀相關實驗中,抗原的起始濃度相對其它免疫相關實驗(WB和IF等)要低得多,所以對抗體的親和力相對其它實驗提出了更高的要求,這就需要使用高親和力的抗體去進行免疫沉淀相關實驗。同時,由于免疫沉淀相關實驗主要是在生理條件下進行,所以需要抗體識別蛋白的天然表面構像,因此選擇的抗體其針對的抗原決定簇需要暴露在蛋白表面。

滬公網安備 31011802001676號

主站蜘蛛池模板: 欧美一区二区亚洲 | 特级做a爰片毛片免费看一区 | 亚洲一级黄色毛片 | 成人在线免费观看网站 | 日本高清黄色 | 在线播放黄 | 一级特黄录像免费播放冫 | 国产大片免费观看网站 | 欧美成亚洲 | 日韩免费中文字幕 | 欧美日韩亚洲人人夜夜澡 | 国产精品剧情原创麻豆国产 | 99热精品国产三级在线观看 | 国产亚洲精品不卡在线 | 日韩精品视频在线播放 | 久久免费公开视频 | 国产啊v在线观看 | 婷婷丁香九月 | 成人天堂在线 | 美女久久精品 | 九九精品免视频国产成人 | 在线观看国产精品日本不卡网 | 国产福利足控交在线观看 | 另类综合视频 | 丁香婷婷开心激情深爱五月 | 妞干网免费 | 国产无限免费观看黄网站 | 特极毛片 | 偷看老师裙底无内裤福利图片 | 欧美伊人久久久久久久久影院 | 特大巨黑人吊与黑人性xxxx | 制服丝袜视频在线 | 欧美一区高清 | 97超级碰碰碰碰在线视频 | 午夜激情在线观看 | chinese国产videos国产 | 日韩 欧美 亚洲国产 | 综合久久精品 | 国产色视频一区二区三区 | 簧片在线免费看 | 五月婷婷综合在线视频 |