天天射天天爽-天天射天天添-天天射天天舔-天天射天天做-天天射网

當前位置:
首頁 > 技術文章 > HRGEC 人腎小球內皮細胞
目錄導航 Directory
服務熱線
技術支持Article
HRGEC 人腎小球內皮細胞
點擊次數:1614 更新時間:2019-11-20

HRGEC 人腎小球內皮細胞

Catalogue No.: C818

Product Format: a T25 flask

Culture Properties貼壁

Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%雙抗

Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

Application:  Cells and cancer research

NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

 

Components  

Item

Specifications

a T25 flask

2X106

Manual

1 copy

 

Operation steps for cell culture

  • 吸走用于培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;
  • 吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;
    (細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態,導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞*漂浮。混勻細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
  • 加入6-8ml*培養基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;
  • 將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養;

傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。

Cell cryopreservation

1.凍存液:92%*培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)

2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。

Tips:

  • 細胞經過運輸后,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現象。貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900-1000rpm(約150g)離心3min,棄上清。加5ml PBS重懸細胞,再900-1000rpm(約150g)離心3min,用新鮮的*培養基重懸接種到新的培養瓶。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時碎片比較少,傳代時可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗次。
  • 細胞生長不均時,可以將細胞消化吹散后加入新的培養基重新接種或傳代。
  • 細胞生長緩慢時,可以選擇提高血清濃度培養(不超過20%),也可以根據細胞生長狀態,選擇傳代細胞到新的培養瓶中繼續培養。
  • 不同細胞貼壁性差異比較大,所以消化時間差別較大,20s-10min均有可能,具體以細胞消化到相互分離但未脫落,并可以輕輕吹下為準,嚴禁消化到細胞*漂浮。

滬公網安備 31011802001676號

主站蜘蛛池模板: 日韩在线一 | 黄色网址在线免费播放 | 中文字幕成人乱码在线电影 | 国内免费在线视频 | 亚洲精品午夜aaa级久久久久 | 久草在线免费资源站 | 国产一级特黄全黄毛片 | 全免费一级午夜毛片 | 久久99精品久久久久久综合 | 亚洲精品久久久久影 | 欧美黄色a | 日本精品一区二区三区在线 | 国产色秀视频在线观看 | 欧美一级特黄高清免费 | 国产三香港三韩国三级不卡 | 免费一看一级毛片 | 在线视频国产网址你懂的在线视频 | 国产日本三级欧美三级妇三级四 | 欧美毛片精品一区 | 国产成人久久777777 | 欧美一级片毛片 | 国产成人精品日本亚洲网站 | 婷婷久久综合网 | 麻豆入口 | 日本久久网站 | 中国黄色一级毛片 | 91小视频版在线观看www | 亚洲福利一区二区精品秒拍 | 亚洲 欧美 国产 制服 动漫 | 欧美日韩高清在线 | 超级碰碰碰视频在线观看 | 一级毛片免费观看不卡视频 | 韩日视频在线观看 | 久久综合九色综合97飘花 | 日韩 欧美 国产 亚洲 中文 | 国产精品高清在线观看 | 亚洲一级毛片欧美一级说乱 | 一本久道热中字伊人 | 婷婷色九月| 亚洲 欧美 精品 中文第三 | 亚洲地址一地址二地址三 |